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技術(shù)文章

小鼠ELISA試劑盒測定系統(tǒng)的表達(dá)
點(diǎn)擊次數(shù):929 更新時間:2018-10-25

      小鼠ELISA試劑盒測定小分子量物質(zhì)常用競爭法,其標(biāo)準(zhǔn)曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。注意橫坐標(biāo)為對數(shù)關(guān)系,這更有利于測定系統(tǒng)的表達(dá)。


、血清


血清是常用于ELISA檢測的一類樣本,處理也比較簡單。

     用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃000×g離心20分鐘,仔細(xì)收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。

     ELSIA試劑盒采血過程中應(yīng)避免溶血,因?yàn)榧t細(xì)胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為標(biāo)記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色,而導(dǎo)致檢測的不準(zhǔn)確性。同時也應(yīng)避免細(xì)菌污染,因?yàn)榫w內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導(dǎo)致檢測的假陽性。

2、血漿


    用含抗凝劑的或離心管采集血液標(biāo)本,標(biāo)本采集后30min內(nèi)4℃000×g離心5min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

     常用的抗凝劑為EDTA、和等,檢測時還應(yīng)仔細(xì)閱讀試劑盒說明書,檢查試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。

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